1.1 试验材料

枯草芽孢杆菌168制剂（活芽孢数为1.0×10⁹ CFU/g）、表面展示鸡白痢沙门菌外膜蛋白OmpC的重组枯草芽孢杆菌SE1制剂（活芽孢数为1.0×10⁹ CFU/g）均由本研究中心提供。

1.2 试验设计与试验饲粮

选择7日龄科宝500（Cobb-500）肉鸡120只，随机分为3组，每组4个重复，每个重复10只鸡。Ａ组（对照组）饲喂基础饲粮，B组在基础饲粮中添加0.1％（1.0×10⁶CFU/g）枯草芽孢杆菌168制剂，Ｃ组在基础饲粮中添加0.1％（1.0×10⁶ CFU/g）重组枯草芽孢杆菌SE1制剂，添加量由前期相关预试验确定。基础饲粮（无****）由成都市彭州某饲料厂提供，其组成及营养水平见表1。

2.2 重组枯草芽孢杆菌SE1对肉鸡肠道消化酶活性的影响

由表3可知，28日龄时，B组和Ｃ组肉鸡的空肠脂肪酶和回肠蛋白酶活性显著高于Ａ组（P＜0.05）；42日龄时，B组和Ｃ组肉鸡的空肠脂肪酶、蛋白酶和回肠蛋白酶活性显著高于Ａ组（P＜0.05）。B组肉鸡的肠道消化酶活性与Ｃ组相比无显著差异（P＞0.05）

3.1 重组枯草芽孢杆菌SE1对肉鸡生长性能的影响

张晓云等研究表明，枯草芽孢杆菌可**肉鸡的日增重和采食量，降低料重比。本研究表明，与对照组相比，饲粮中添加重组枯草芽孢杆菌SE1可增加肉鸡的终末体重和平均增重，降低料重比。研究也表明，枯草芽孢杆菌能够改善动物的消化机能，**饲料利用率，促进动物生长。Bai等研究发现，饲喂枯草芽孢杆菌可增加肉鸡的日增重，这可能是由于枯草芽孢杆菌能够通过分泌蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等消化酶及多种维生素、生长因子和氨基酸来**肉鸡的肠道消化功能，促进机体对营养物质的消化吸收。刘瑞瑞研究表明，鸡口服禽流感重组枯草芽孢杆菌能显著增强鸡的全身性免疫水平，极显著增加鸡的小肠绒毛高度；其对鸡体重的**作用优于正常枯草芽孢杆菌。本试验研究表明，与枯草芽孢杆菌168相比，重组枯草芽孢杆菌SE1组肉鸡的终末体重和平均增重增加，料重比降低，但差异均不显著。可能是由于重组枯草芽孢杆菌SE1增加了机体的免疫功能，改善了小肠黏膜形态结构，尤其是影响了肠绒毛的生长和发育，进而间接影响了机体的生长性能；而差异不显著可能是由于本试验饲养条件以及肉鸡品种较好，所以重组枯草芽孢杆菌SE1对肉鸡生长性能的作用效果与枯草芽孢杆菌168相比无显著差异。郭晓敏研究表明，在攻毒前，饲喂鸡白痢沙门菌OｍpC⁃DC重组乳酸菌对鸡体重的影响与乳酸菌组和对照组相比无显著差异，与本试验结果相一致。

3.2 重组枯草芽孢杆菌SE1对肉鸡肠道消化酶活性的影响

动物肠道消化酶主要包括淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶等，机体的生长代谢与消化酶活性的高低密切相关。Zokaeifar等给南**对虾饲喂枯草芽孢杆菌8周后，发现试验组的肠道蛋白酶和淀粉酶活性显著高于对照组。卞国顺等研究报道，饲粮中添加10⁵ CFU/g枯草芽孢杆菌可显著**岭南黄羽肉鸡的空肠胰蛋白酶和淀粉酶活性，但脂肪酶活性显著降低。刘清华等研究发现，饲喂枯草芽孢杆菌可显著**鳗鲡消化道中蛋白酶和淀粉酶活性。本试验中，饲喂重组枯草芽孢杆菌SE1可显著**肉鸡的空肠脂肪酶和回肠蛋白酶活性，与以上研究结果相一致，这与枯草芽孢杆菌具有产生蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等消化酶的特性密切相关；但肠道淀粉酶活性并未显著**，与上述研究略有不同，这可能是由于枯草芽孢杆菌分泌的酶**了内源淀粉酶的活性，还可能是由于试验条件和试验动物种类不尽相同所致。而重组枯草芽孢杆菌SE1组肉鸡的肠道消化酶活性与枯草芽孢杆菌168组相比无显著差异，说明二者均能**肉鸡的肠道消化酶活性，枯草芽孢杆菌芽孢衣壳表面在展示鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白ＯｍpC后，并不会影响其**肠道消化酶活性的功能。

3.3重组枯草芽孢杆菌SE1对肉鸡肠道菌群的影响

研究证实，枯草芽孢杆菌能够维持动物肠道微生态平衡，增加肠道菌群多样性。裴跃明等发现，饲粮中添加枯草芽孢杆菌能显著降低蛋鸡的盲肠大肠杆菌数量，增加乳酸菌和双歧杆菌数量。Park等研究发现，饲喂枯草芽孢杆菌能显著增加肉鸡盲肠的乳杆菌数量，降低沙门氏菌数量。Gao等试验发现，饲粮中添加枯草芽孢杆菌可显著降低肉鸡的盲肠大肠杆菌和沙门氏菌数量，增加乳酸菌数量。这主要是因为：

1）枯草芽孢杆菌孢子进入动物肠道后，迅速萌发成繁殖体，通过生物夺氧造成肠道厌氧环境，有利于厌氧菌的生长；

2）产生挥发性脂肪酸和乳酸等有机酸，降低肠道pH，从而**致病菌生长；

3）枯草芽孢杆菌能分泌多种具有拮抗作用的多肽。本试验中，饲粮中添加重组枯草芽孢杆菌SE1可使肉鸡的回肠和盲肠大肠杆菌数量显著减少，盲肠乳杆菌数量显著增加，与以上研究结果相一致。

肠道菌群的丰富度提示肠道菌群种类多样，均匀度和香农维纳指数提示肠道菌群的均匀分配，种类越多，分配越均匀，环境越稳定，三者在一定程度上能够提示肠道微生态环境的稳定性。本试验结果显示，饲粮中添加重组枯草芽孢杆菌SE1，肉鸡盲肠菌群的丰富度、均匀度和香农维纳指数均显著高于对照组。重组枯草芽孢杆菌SE1组肉鸡的盲肠菌群组内的相似性显著高于对照组，其中28日龄时高26.8％，42日龄时高15.6％；而与枯草芽孢杆菌168组相比，相似性达到90％以上。PCR-DGGE指纹图谱结果显示，重组枯草芽孢杆菌SE1组的特异性条带数与枯草芽孢杆菌168组完全相同，多于对照组。测序条带以梭菌属和乳杆菌属等有益菌为主，说明重组枯草芽孢杆菌SE1能够**肉鸡的盲肠菌群多样性，维持肠道菌群的稳定性，与赵秀英等、Wang等、朱沛霁的报道结果相一致。但重组枯草芽孢杆菌SE1组和枯草芽孢杆菌168组中均出现了条件致病菌液化沙雷氏菌，该菌是否对肉鸡存在致病作用以及存在的原因，有待进一步研究。

本试验中，饲粮中添加重组枯草芽孢杆菌SE1和枯草芽孢杆菌168对肉鸡盲肠菌群数量及菌群多样性的影响基本一致，无显著性差异。但刘明刚等研究表明，重组枯草杆菌芽孢经口服免疫可诱导机体产生特异性血清IgG和肠黏膜SIgA抗体，并可赋予小鼠抗鼠伤寒沙门氏菌感染的交叉保护作用。刘瑞瑞研究发现，鸡口服禽流感重组枯草芽抱杆菌能够显著**局部黏膜体液特异性SIgA和血清特异性IgG含量。郭晓敏研究表明，饲粮中添加鸡白痢沙门菌OmpC-DC重组乳酸菌，鸡血清IgG和肠内容物SIgA含量显著增加。结合本试验结果，说明重组枯草芽孢杆菌SE1可以在不改变枯草芽孢杆菌168益生效果的基础上，诱导机体产生特异性免疫保护作用，并对异源沙门氏菌感染提供交叉保护作用，这也为枯草芽孢杆菌进一步开发利用和新型沙门氏菌疫苗的研发提供了新的思路。